锦旗研发 | 口腔卫兵队—锦旗生物Bioflag的口腔专利菌株

　　锦旗生物专利选自鼠李糖乳杆菌 ( Lactobacillus rhamnosus ) F-1 菌株、唾液乳杆菌 ( Lactobacillus salivarius ) AP-32菌株、罗伊氏乳杆菌 ( Lactobacillus reuteri ) GL-104菌株、副干酪乳酸杆菌 ( Lactobacillus paracasei ) GL-156菌株、瑞士乳杆菌 ( Lactobacillus helveticus ) RE-78菌株、鼠李糖乳杆菌 ( Lactobacillus rhamnosus ) CT-53菌株和副干酪乳杆菌 ( Lactobacillus paracasei ) ET-66菌株中，至少有一个分离的乳酸菌菌株的乳酸菌食品、口腔清洁剂和医药组合物。通过开发现存的功能性益生菌，提供抑制口腔内致病菌的生长，美白牙齿，改善口臭问题的新方案。

市场规模

　　在全球，约35.8亿人患有口腔疾病，其中龋齿是最常见的口腔问题。在中国，35~44岁的中年人龋齿比例为88.1%，而65~74岁的老年人群中，龋齿率高达98.4%。

　　同时，在2020年，全球口腔护理市场份额约为438.292亿美元，即2853.8亿人民币，且复合年增长率为4.8%。而在中国，口腔护理市场份额约为484亿人民币，并保持着10%的复合年增长率。

疾病特点

　　常见的口腔问题包括龋齿，牙石，牙菌斑，牙龈出血，牙本质敏感，牙齿不洁白，口气。因此，口腔问题具有症状多，病因杂，治疗麻烦，甚至有些口腔问题是不可逆的。而引起口腔问题的最主要因素为口腔致病菌。例如：变形链球菌会造成龋齿;具核梭杆菌多型亚种会造成牙周病、口臭及结肠癌等问题;放线共生放线杆菌会引起牙周炎、口腔发炎及肺炎。同时，不仅是口腔疾病，作为食物进入人体的首个通道，阿尔兹海默症、心血管疾病、囊状纤维化、大肠癌、食道癌、糖尿病和类风湿性关节炎都和口腔问题相关联。因此，口腔问题是已经成为中国一个重要的公共卫生问题。

功能介绍

来源及常见功能

　　本发明所描述的乳酸菌菌株的冷冻干燥培养物寄存在台湾食品工业发展研究所，地址为中国台湾省新竹市食品路331号。经研究结果证实的主要功能如下：

　　1.抑制变形链球菌(Streptococcus mutans)

　　2.抑制具核梭杆菌多型亚种(Fusobacterium nucleatum subsp.polymorphum)

　　3.抑制放线共生放线杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans)

　　4.抑制牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis 18)

　　5.分泌过氧化氢，抑制口腔病原菌的生长和美白牙齿

有效剂量

　　在食品组合物和医药组合物中，乳酸菌菌株的数量不应该低于1×106 CFU;更甚者，可以达1×1010CFU以上。

专利号：TW I639389 B

　　发明名称：用于抑制口腔病原菌的乳酸菌食品、口腔清洁剂和医药组合物

　　摘 要

　　一种选自以下群组中，至少有一个分离的乳酸菌菌株：

　　鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)F-1菌株、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)AP-32菌株、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)GL-104菌株、副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracasei)GL-156菌株、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)RE-78菌株、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)CT-53菌株和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)ET-66菌株。

　　上述乳酸菌菌株具有抑制口腔病原菌的作用，且以食品、口腔清洁剂和医药组合物的形式存在。

发明的背景技术

TW I639389 B发明专利说明书中指出

　　技术领域

　　[0001] 本发明是有关一种食品组合物、口腔清洁组合物和医药组合物，特别是一种包含能抑制口腔病原菌的乳酸菌菌株的食品组合物、口腔清洁组合物和医药组合物。

　　背景技术

　　[0002] 婴幼儿乳牙的健康会影响到未来的恒久齿的生长，因此，从婴儿时期开始，口腔清洁就十分重要。细菌容易附着于牙龈表面，若口腔上有细菌滋生，待乳齿长出后会直接附着于婴儿的乳齿上并造成龋齿。因此，乳牙是一切牙齿的基础，因为乳牙可为未来恒久齿的生长提供适当的空间及距离。若乳牙没有照顾好，放任乳牙产生龋齿，龋齿会导致未来恒久齿生长的空间严重丧失，且将来恒久齿在发育时，周围都将是细菌与脓包，这种环境会导致新长出来的牙齿更容易形成龋齿，甚至影响成年及老年时期的牙周病发生率。

　　[0004] 一般食用含乳酸菌(LAB)的产品仅具有调整肠道健康的效果。自然界中虽然有数以万计的乳酸菌菌株存在，但目前仅发现少数乳酸菌菌株可能具有维护口腔健康及美白牙齿的潜在性附属特质。而这些菌株所具有的抑制口腔病原菌、吸附口腔黏膜表皮细胞、在洁牙产品中是否仍能维持抑制病原菌及产生过氧化氢的能力等特异性性质，是激发菌株在口腔展现功能，控制口腔中的微生态平衡、筛选有维护口腔健康及美白牙齿功能的功能性菌株时的重要依据。

　　[0005] 文献指出，益生菌可以通过与病原菌竞争贴附的生存区域和营养，促进病原菌产生聚集特性，并分泌抑菌物质使得病原菌变得虚弱或甚至杀死病原菌的方式，来达到减少口腔病原菌数量并维持口腔健康的功效，同时分泌过氧化氢来达到去除口腔气味和美白牙齿的目的。

　　[0006] 时至今日，仅有少数菌株经实验过程发现具备有维持口腔健康和美白牙齿的活性效果的乳酸菌菌株被确认。而乳酸菌对身体健康的功能在于菌株(strain)的特异性而非菌种(species)，此种对于人的身体健康有特殊功效的菌株被称为功能性益生菌(Guidelines for the evaluation of probiotics in food;Report of joint FAO/WHO working group on drafting guidelines for the evaluation of probiotics in food;London Ontario,Canada April 30 and May 1,2002:1-7)。

　　[0007] 综上所述，开发具有抑制口腔病原菌活性效果的功能性益生菌 是目前需努力的目标。

发明的主要内容

　　技术问题

　　[0008] 本发明提供一种含乳酸菌菌株的食品组合物、口腔清洁组合物和医药组合物，其可以通过抑制口腔病原菌的生长来维持口腔健康。

　　技术方案

　　[0015] 本发明所描述的乳酸菌菌株的冷冻干燥培养物寄存在台湾食品工业发展研究所，地址为中国台湾省新竹市食品路331号。

　　[0018] 在食品组合物的实施例中，生理上可接受的赋形剂或稀释剂可为食品，举例而言，食品可包含但不限于乳制饮品、茶、咖啡、口香糖及洁牙糖 (例如口含片、咀嚼锭、软糖等)、宠物用肉干或以上各项的组合，其中乳制饮品可包含发酵乳、酸奶、奶酪或乳粉。在口腔清洁组合物的实施例中，赋形剂或稀释剂可为牙膏、洁牙粉、漱口水、口气清新喷雾、涂氟剂(例如涂抹于幼儿牙齿上的氟剂)、假牙清洁剂、宠物用洁牙胶或宠物用化毛膏等;载体可为牙刷、牙间刷、牙线、口腔棉棒或宠物用洁牙骨等。医药组合物可包含口服剂型或外用剂型。举例而言，口服剂型可为锭剂、胶囊、溶液剂及粉剂等。

　　本发明原理

　　具有特异性性质的个别乳酸菌菌株不但可以抑制龋齿菌和牙周菌之外，还能通过和口腔致病菌竞争在口腔黏膜中的生存空间和营养，致使口腔病原菌的凝集而排除。因此，通过实验检测本发明选用的乳酸菌对口腔病原菌的抑制能力来验证本发明对口腔问题的缓解作用。

专利研究

　　分析菌株产生过氧化氢的特性，以此来确认菌株对牙齿的美白功能

　　将待测益生菌放在加入了三甲基硼(0.25mg/ml)和辣根过氧化物酶(0.01mg/ml)的平板上培养，利用聚落周围的颜色和过氧化氢感测试纸侦测乳酸菌菌体及二次代谢物含有的过氧化氢浓度。

　　实验结果显示本发明的鼠李糖乳杆菌F-1菌株、唾液乳杆菌AP-32菌株、罗伊氏乳杆菌GL-104菌株、副干酪乳杆菌GL-156菌株、瑞士乳杆菌RE-78菌株以及鼠李糖乳杆菌CT- 53 菌株皆能够分泌过氧化氢。但是，这些菌株的代谢产物中，只有唾液乳杆菌AP-32菌株、罗伊氏乳杆菌GL-104菌株、瑞士乳杆菌RE-78菌株、鼠李糖乳杆菌CT- 53 菌株能将分泌的过氧化氢扩散至液体中。而鼠李糖乳杆菌F-1菌株、唾液乳杆菌AP-32菌株、罗伊氏乳杆菌GL-104菌株、瑞士乳杆菌RE-78菌株、鼠李糖乳杆菌CT- 53 菌株将过氧化氢存留在菌体内，使菌体本身带有过氧化氢。

　　分析维持口腔健康的乳酸菌对于口腔病原菌的抑制能力

　　将本发明中使用的乳酸菌和口腔致病菌(变形链球菌、具核梭杆菌多型亚种、放线共生放线杆菌、牙龈卟啉单胞菌17和牙龈卟啉单胞菌18)在37°C环境中共同培养2-4天，然后计数病原菌的数量。

得到结论

　　鼠李糖乳杆菌F-1菌株、鼠李糖乳杆菌CT- 53 菌株以及副干酪乳杆菌ET-66菌株对五株病原菌都具有抑制能力，且鼠李糖乳酸杆菌CT-53菌株对于变形链球菌抑制效果最好。

　　罗伊氏乳杆菌GL-104菌株和副干酪乳杆菌GL-156菌株可以抑制四株口腔病原菌，对于变形链球菌并无抑制能力。

　　唾液乳杆菌AP-32菌株和瑞士乳杆菌RE-78菌株能抑制三株口腔病原菌，对于变形链球菌以及放线共生放线杆菌无抑制能力。

　　唾液乳杆菌AP-32菌株对于能够抑制的三株病原菌，其抑制能力皆高达90%以上，而且这三株口腔病原菌都与口臭问题息息相关，因此唾液乳杆菌AP-32菌株不仅可以抑制口腔病原菌的生长，还可以改善口臭问题。

七株乳酸菌菌株

抑制口腔病原菌的抑制率

　　*专利里面的菌种后经更进一步鉴定为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)F-1菌株、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)AP-32菌株、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)GL-104菌株、副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracasei)GL-156菌株、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)RE-78菌株、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)CT-53菌株和副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)ET-66菌株。与图表所示有差异。